常规的细胞增殖检测技术
细胞是以分裂的方式进行增殖的。单细胞生物，以分裂的方式产生新个体。多细胞生物，以分裂的方式产生新细胞，从而补充体内衰老或死亡的细胞，有丝分裂是真核生物进行细胞分裂的主要方式。细胞增殖是生物体生长发育、繁殖遗传的基础，所以对细胞增殖的检测一直是一大研究热点。
常规细胞增殖检测技术包括以下几种：
（1）标志蛋白的WB检测等。
PCNA（Proliferating Cell Nuclear Antigen）是增殖细胞相关的核抗原，在DNA复制以及细胞增殖的启动中起重要作用。Ki67也是一种细胞增殖核抗原，在有丝分裂中维持DNA结构的稳定性，在细胞周期G0期无表达，G1期开始表达，S期和G2期表达量逐渐升高，M期表达量最高，有丝分裂结束后则降解消失。WB实验可对PCNA或Ki67的表达水平进行检测，从而间接得知细胞增殖情况。
优势：简便性，广泛性，无组织特异性。
劣势：间接反映细胞增殖的情况。
（2）EdU检测
EdU （5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷）是一种胸腺嘧啶核苷类似物，在细胞增殖时能够插入正在复制的DNA分子中。基于EdU与荧光染料的特异性反应检测DNA复制活性。现多用EdU检测替代BrdU检测。
优势：体外实验，检测灵敏度高，可与多种抗体或荧光蛋白同时标记。
劣势：具有毒性。
（3）CFSE检测法
羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）是一种荧光染料，可穿透细胞膜，进入细胞后不可逆的与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上，细胞分裂时，标记荧光平均分配至2个子代细胞中，荧光强度是亲代细胞的一半。利用流式细胞仪的488nm激发光检测。
优势：直接法，活细胞检测。
劣势：CFSE浓度太低，荧光强度不够；浓度太高，毒性影响细胞增殖。
（4）CCK8检测法。
CCK8检测法是MTT检测法的升级版。CCK8检测试剂中含有WST-8，WST-8是一种类似于MTT的化合物，可被线粒体内的脱氢酶还原生成水溶性的甲臜。细胞增殖越多越快，颜色越深。酶联免疫检测仪测定450nm吸光度。
优势：简便，结果直观，活细胞检测。
劣势：间接反映活细胞数量。CCK8试剂颜色为淡红色，与含酚红的培养基颜色相近，不注意的话容易漏加或多加。
云克隆公司现推出了活性蛋白产品，活性蛋白对细胞增殖影响的检测，我们多采用的是CCK8检测法结合镜检观察。如表皮生长因子活性蛋白（APA560Hu02），其浓度升高后，可刺激3T3细胞增殖，结果如下:
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