His-tag标签单克隆抗体-重组蛋白检测的好帮手

通过重组技术获取目的蛋白是目前应用最广泛的生物技术之一,目的蛋白的纯化是重组 技术中最关键也是最难的一步,纯化的好坏决定了目的蛋白的优劣。目前常规方法是使用目 的蛋白和一个亲和纯化标签(Tag)融合表达,通过亲和纯化标签蛋白来纯化目的蛋白。

同时,如何检测目的蛋白的表达也是生物工作者面临的一大问题,针对不同的目的蛋白 运用不同的目的蛋白特异性抗体显然太复杂且成本太高,有时甚至在市场上根本找不到和实 验者相匹配的特异性抗体。如果我们选择针对标签蛋白的特异性抗体则不仅解决了检测这个 难题,而且这个抗标签的单抗就相当于我们平时所使用的“二抗”,也就是说,对于任何使 用了同一个标签蛋白的目的蛋白都可以检测了,因此,抗标签蛋白的抗体对于基因工程工作 者是一个非常实用的目的蛋白检测工具。

常用的 Tag 包括 Myc、HA、Flag、His、Gst 等,其中 His 是最常使用的。而 His-Tag(HHHHHH),这个只有 6 个组氨酸的标签在 pH8.0 时不带电,很小,几乎没有什么 免疫原性,因此,它的抗体,包括多抗和单抗,制备是非常难的,以至于在市面上很难找到 好的抗 His 标签的抗体,就算有,也是国外进口且很贵。

优尔生公司尝试过很多传统方法制备 His 单抗均未成功,终于在使用自主研发的特殊方 法后,成功制备出抗 His-tag 小鼠单克隆抗体(Monoclonal Antibody to Hexa Histidine-Tag (H6), MAX656Ge21)。经检测,其特异性好,性质稳定,完全可以运用于所有带 His-Tag 的不同目 的蛋白的检测。

His-tag 抗体可用于检测与 His-tag 融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性 或定量检测 His-tag 融合表达蛋白等。本抗体可以检测位于融合蛋白 N-terminal 的 His-tag, 也可以检测位于融合蛋白 C-terminal 的 His-tag。目前,优尔生公司自主研制的其他标签蛋白 的抗体还有 GST 标签蛋白抗体等。