磷酸化多抗和单抗的制备
蛋白质的翻译后修饰在蛋白质组学研究领域具有重要地位，近年来表现出更为火爆的趋势。蛋白质的翻译后修饰是指蛋白质在翻译后会在不同的基团上发生不同的修饰，如磷酸化、糖基化、甲基化、乙酰化等。蛋白质磷酸化是各种蛋白质修饰方式中最为常见、最重要的一种，它由蛋白激酶和磷酸酶，这两个作用相反的酶系构成，是一个可逆的过程。研究发现，蛋白质的可逆磷酸化几乎涉及到生物体内多种生理和病理过程，如糖代谢、光合作用、细胞的生长发育、基因表达、神经递质的合成与释放，甚至癌变等等，在细胞的信号传递过程中占有极其重要的地位，是细胞生命活动的调控中心。磷酸化的抗体可以特异性的识别蛋白质磷酸化位点，可以作为蛋白质是否磷酸化的重要检测工具，而且可以在避免放射性污染的情况下，对磷酸化蛋白进行定性和定量分析，因此特异性磷酸化抗体是研究蛋白质磷酸化的重要工具。
磷酸化抗体和非磷酸化抗体在研究中的应用各有不同，制备工艺上也有所区别，主要表现在以下几个方面：
1、磷酸化抗体是针对蛋白磷酸化位点设计制备的，主要用于检测蛋白磷酸化的变化情况。
2、非磷酸化抗体（普通抗体）是针对蛋白非磷酸化位点设计制备的，主要检测组织或细胞中该蛋白的表达情况，组织特异性或亚细胞地位，也可以作为磷酸化水平变化的内参等。
3、普通抗体的合成：蛋白或者偶联多肽->免疫动物->收获多抗（细胞融合->腹水制备->单抗纯化）。
4、磷酸化抗体合成：人工合成含磷酸化位点的多肽->人工体外磷酸化->多肽偶联载体->免疫动物->收获多抗（细胞融合->腹水制备->单抗纯化）。
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