铁调素（Hepc）活性蛋白
铁调素（Hepcidin，Hepc）是铁代谢的调节因子。Hepcidin通过与位于肠道肠上皮细胞基底外侧表面和网状内皮细胞（巨噬细胞）质膜上的膜铁转运蛋白（ferroportin，FPN）结合来抑制铁离子的转运。Hepc最终分解溶酶体中的转运蛋白，抑制FPN而阻止铁离子的输出，铁离子被隔离在细胞中。
实验目的
FPN已被鉴定为Hepc的相互作用因子，因此采用结合ELISA法检测重组人Hepc与重组人FPN的相互作用。
实验步骤：
用含有0.01%BSA的PBS（pH 7.4）梯度稀释Hepc。将100uL样本移入FPN蛋白预包被的酶标板中，37℃反应2小时。弃去孔内液体，用PBST洗板3次。加入抗Hepc的pAb后孵育1小时，弃去孔内液体，用PBST洗板3次。再加入HRP标记的二抗孵育后，弃去孔内液体，用PBST洗板3次。加入底物溶液，在37℃孵育15-25分钟。最后，向孔中加入50µL终止液，并立即在450nm下读数。
实验结果：Hepc与FPN的结合活性如Figure 1所示。
实验结论：
Hepc可与FPN的结合，且这种作用呈剂量依赖性。
参考信息：
云克隆铁调素（Hepc）活性蛋白货号：APB979Hu61